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細胞復(fù)蘇有何注意事項?

更新時間:2023-09-14點擊次數(shù):1050

細胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng),細胞恢復(fù)生長的過程。那么你知道在細胞復(fù)蘇過程中有何注意事項嗎?讓我們一起來看看吧!

1. 取凍存細胞時應(yīng)做好防護措施,戴好防凍手套,護目鏡。如果凍存管密封不嚴,液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,將可能發(fā)生爆炸。

2. 細胞放入水浴中復(fù)蘇時注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動,使其受熱均勻,且速度越快越好,這樣可以最大限度的保存細胞活力,并防止水浴鍋的水進入細胞凍存管造成細胞污染。

3. 打開細胞凍存管之前要用酒精棉球?qū)龃婀芟静⒘栏?。注意無菌操作,細胞復(fù)蘇后的操作在4℃冰盒中進行,以減少冷凍保護劑對細胞的毒性。

4. 解凍時間在2min以內(nèi)完成,且整個過程盡量避免吹打細胞產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致細胞復(fù)蘇后的生長狀態(tài)不佳。

5. 復(fù)蘇細胞的時候盡量避免凍存管接縫處沾水,防止支原體污染,實驗室定期用過氧化氫熏蒸,細胞小黑點增多時用支原體檢測試劑盒檢測,并且及時清除。

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